J Pharm Sci. 2020 févr.;109(2):981-991. doi: 10.1016/j.xphs.2019.10.052. Epub 2019 nov. Conjugaison de polyesters fonctionnalisés par des amines avec de la diméthylcaséine à l'aide de la transglutaminase microbienne Abstrait Les conjugués protéine-polymère sont utilisés en thérapeutique car ils présentent souvent une stabilité supérieure, une demi-vie in vivo prolongée et une immunogénicité inférieure à celle des protéines natives. La première partie de ce rapport décrit la synthèse enzymatique du poly(adipate de glycérol) (PGA(M)) par transestérification entre le glycérol et l'adipate de diméthyle en utilisant la lipase B de Candida antarctica. Le PGA(M) est un polyester hydrophile, biodégradable mais insoluble dans l'eau. Par acylation, le PGA(M) est modifié par l'acide 6-(Fmoc-amino)hexanoïque et par des chaînes latérales hydrophiles de poly(éthylène glycol) (mPEG12), ce qui rend le polymère hautement soluble dans l'eau. Cette étape est suivie de l'élimination des groupes protecteurs, le fluorénylméthyloxycarbonyle, pour générer un polyester à groupements amines primaires, à savoir le PGA(M)-g-NH2-g-mPEG12. La spectroscopie RMN 1H, la spectroscopie IRTF et la chromatographie par perméation de gel ont été utilisées pour déterminer la structure chimique et l'indice de polydispersité du PGA(M) avant et après modification. Dans la deuxième partie, nous analysons la conjugaison, médiée par la transglutaminase microbienne, de la protéine modèle diméthylcaséine avec le PGA(M)-g-NH₂-g-mPEG12 dans des conditions de réaction douces. La SDS-PAGE confirme la conjugaison protéine-polyester. Mots-clés: CAL-B ; polyester fonctionnalisé par amine ; polymérisation enzymatique ; transglutaminase microbienne (mTGase) ; poly(adipate de glycérol) (M) ; conjugué protéine-polymère.

Bioconjug Chem. 19 févr. 2025 ; 36(2) : 179-189. doi : 10.1021/acs.bioconjchem.4c00392. Publication en ligne le 20 janv. 2025. La pégylation du lieur dipeptide améliore l'indice thérapeutique et la pharmacocinétique des conjugués anticorps-médicament Abstrait Les charges utiles hydrophobes incorporées dans les conjugués anticorps-médicament (CAM) sont généralement supérieures aux charges utiles hydrophiles en termes de pénétration tumorale et de « mortalité indirecte » après libération des CAM. Cependant, elles sont sujettes à l'agrégation et à une clairance plasmatique accélérée, ce qui entraîne une réduction de l'efficacité et une augmentation de la toxicité des molécules CAM. L'incorporation de polyéthylène glycol (PEG) ou de groupes sucres dans les lieurs des CAM pour masquer l'hydrophobicité des charges utiles s'est avérée une alternative viable à l'adoption directe de charges utiles hydrophiles. Dans cette étude, des lieurs CAM incorporant du PEG ou des groupes sucres ont été synthétisés par modification de lieurs dipeptidiques, la monométhylauristatine E (MMAE) hydrophobe servant de charge utile hydrophobe exemplaire. Tous les agents de liaison médicamenteuse (ADC) ont été conjugués à RS7, un anticorps humanisé ciblant Trop-2, avec des valeurs de rapport médicament/anticorps (DAR) fixées à 4 ou 8. Parmi ceux-ci, la molécule ADC RS7-DL 11, comportant une fraction méthyl-PEG24 (mPEG24) comme chaîne latérale du lien Valine-Lysine-PAB (VK), a démontré une hydrophilie, une stabilité biophysique et une suppression tumorale maximales, ainsi qu'une demi-vie prolongée et une tolérance animale améliorée. En conclusion, grâce à la pégylation du lien dipeptidique traditionnel, nous avons démontré une technologie de conjugaison ADC optimisée, utilisable pour la conjugaison de charges utiles ultrahydrophobes, améliorant ainsi l'indice thérapeutique et le profil pharmacocinétique.

Langmuir. 1er juillet 2014 ;30(25) :7465-74. doi : 10.1021/la500403v. Publication en ligne le 17 juin 2014. Effet des espaceurs polyéthylène glycol, alkyle et oligonucléotidique sur la liaison, la structure secondaire et l'auto-assemblage des aptamères-amphiphiles FKN-S2 liant la fractalkine Abstrait Nous avons précédemment identifié un aptamère, nommé FKN-S2, qui se lie à la protéine de surface cellulaire fractalkine avec une affinité et une spécificité élevées. Dans cet article, une queue dialkyle hydrophobe en C16 a été ajoutée à l'aptamère pour créer un aptamère-amphiphile. Nous avons étudié comment la queue et une molécule espaceur de longueur et d'hydrophobicité variables, insérée entre la queue et la tête de l'aptamère, affectent la liaison, la structure et les propriétés d'auto-assemblage de l'aptamère-amphiphile. Nous avons synthétisé des aptamères-amphiphiles sans espaceur (NoSPR), avec des polyéthylène glycols (PEG4, PEG8, PEG24), des alkyles (C12 et C24) ou des oligonucléotides (T10 et T5 : 10 et 5 thymine, et A10 : 10 adénine). L'ajout de la queue a réduit l'affinité de liaison de l'aptamère-amphiphile de plus de 7,5 fois par rapport à l'aptamère libre. Les espaceurs alkyles hydrophobes ont entraîné la plus forte perte d'affinité, tandis que les espaceurs PEG hydrophiles ont amélioré l'affinité amphiphile, sans toutefois la restaurer à celle de l'aptamère libre. Il est intéressant de noter que les espaceurs oligonucléotidiques ont produit les amphiphiles présentant la plus forte affinité. La composition nucléotidique n'a cependant pas affecté l'affinité, les espaceurs T10 et A10 ayant une affinité égale. Les amphiphiles de l'espaceur oligonucléotidique présentaient la plus forte affinité, car l'espaceur oligonucléotidique augmentait l'affinité de l'aptamère libre ; l'aptamère FKN-S2 associé à l'espaceur oligonucléotidique présentait une affinité supérieure à celle de l'aptamère FKN-S2 libre. La spectroscopie de dichroïsme circulaire (CD) et les études de fusion thermique ont indiqué que l'aptamère forme un G-quadruplexe tige-boucle et intramoléculaire, et que la queue stabilisait fortement la formation du G-quadruplexe dans un tampon. L'imagerie par microscopie électronique à transmission cryogénique (cryo-TEM) a montré que les aptamères-amphiphiles, indépendamment de l'espaceur utilisé, s'auto-assemblaient en micelles et nanorubans, structures bicouches plates souvent torsadées. Enfin, des liposomes fonctionnalisés avec l'amphiphile FKN-S2 ont été incubés avec des cellules exprimant la fractalkine, et le degré de liaison dépendait de la concentration de l'amphiphile à la surface des liposomes.

Biosens Bioelectron. 15 sept. 2019:141:111477. doi: 10.1016/j.bios.2019.111477. Publication en ligne le 25 juin 2019. Nouvelle molécule de liaison PEG thiolé pour le développement de biocapteurs sur des surfaces en or Abstrait Les molécules de liaison modifiant la surface peuvent influencer directement les performances et la longévité des biocapteurs. Elles doivent permettre la fixation de la couche de reconnaissance biologique à la surface du capteur, ainsi que la protection de la surface contre l'encrassement. Des avancées récentes dans ce domaine ont identifié plusieurs facteurs clés susceptibles d'accroître l'efficacité, la stabilité et l'effet anti-encrassement d'une couche formée par des molécules de liaison modifiant la surface. Ce travail présente une procédure de synthèse simple, la caractérisation et l'application d'une nouvelle molécule de modification de surface thiolé-PEG (DSPEG2) pouvant servir de liaison polyvalente pour les surfaces d'or. Les analyses de la distribution spatiale moléculaire de DSPEG2 sur les surfaces d'or ont été réalisées par spectrométrie de masse des ions secondaires à temps de vol (TOF-SIMS) et spectroscopie photoélectrique des rayons X (XPS). L'immobilisation de DSPEG2 sur les surfaces d'or a été examinée par voltamétrie cyclique (VC), spectroscopie d'impédance électrochimique (SIE) et résonance plasmonique de surface (RPS). Nos résultats préliminaires ont démontré que DSPEG2 est une nouvelle molécule de liaison prometteuse qui peut être appliquée dans une large gamme de biocapteurs basés sur des surfaces en or. Mots clés : Anti-fouling ; Biocapteur ; Voltamétrie cyclique ; Spectroscopie d'impédance électrochimique ; Adsorption non spécifique ; PEG ; Résonance plasmonique de surface ; Liant synthétique.

F. J Hématol. 2020 mai ; 189(3) : 442-451. est ce que je: 10.1111/bjh.16254. Publication en ligne le 27 décembre 2019. Les patients atteints de leucémie lymphoblastique aiguë traités par PEGasparaginase développent des anticorps contre le PEG et le lieur succinate Abstrait L'asparaginase conjuguée au polyéthylène glycol (PEG) (PEGasparaginase) est essentielle au traitement de la leucémie aiguë lymphoblastique pédiatrique. Nous avons développé un test identifiant les anticorps dirigés contre la fraction PEG, le lieur et le médicament lui-même chez les patients présentant des réactions d'hypersensibilité à la PEGasparaginase. Dix-huit patients traités selon le protocole DCOG ALL-11, présentant une réaction d'hypersensibilité neutralisante à la PEGasparaginase aux premières doses de PEGasparaginase en induction (12 patients) ou en intensification après une interruption de plusieurs mois (6 patients), ont été inclus. La méthode ELISA a été utilisée pour doser les anticorps, enrobés par le lieur succinimidyl succinate conjugué à la BSA, au PEGfilgrastim et à l'asparaginase d'Escherichia coli, et en utilisant la PEGasparaginase hydrolysée et le mPEG5000 pour la compétition. Français Des anticorps anti-PEG ont été détectés chez tous les patients (IgG 100 % ; IgM 67 %), dont 39 % présentaient exclusivement des anticorps anti-PEG. Des anticorps anti-PEG préexistants ont également été détectés chez les patients n'ayant jamais reçu de traitement PEGylé (58 % IgG ; 21 % IgM). Les anticorps dirigés contre le SS-linker ont été principalement détectés pendant l'induction (50 % IgG ; 42 % IgM). Les anticorps anti-asparaginase n'ont été détectés que chez 11 % des patients pendant l'induction, mais chez 94 % des patients pendant l'intensification. En conclusion, les anticorps anti-PEG et anti-SS-linker jouent un rôle prédominant dans la réponse immunogène à la PEGasparaginase pendant l'induction. Ainsi, le passage à l'asparaginase native d'E. coli serait une option pour un traitement adéquat par asparaginase. Mots clés : PEGasparaginase ; leucémie aiguë lymphoblastique ; anticorps.

Revue Nanomedicine (Lond). 2016 avr;11(7):851-65. doi: 10.2217/nnm.16.28. Fonctionnalisation de surface des nanoparticules d'or : monocouche mixte versus lieur hétéro-bifonctionnel Abstrait Pour créer un traitement à base de nanoparticules d'or (AuNP) cliniquement pertinent, la surface doit être fonctionnalisée avec plusieurs ligands tels que des médicaments, des agents antisalissures et des groupes de ciblage. Cependant, fixer plusieurs ligands de chimies et de longueurs différentes, tout en garantissant qu'ils conservent tous leur fonctionnalité biologique, reste un défi. Cette revue compare les deux méthodes de cofonctionnalisation de surface les plus couramment utilisées, à savoir les monocouches mixtes et les lieurs hétérobifonctionnels. Bien que de nombreuses études in vitro aient utilisé avec succès les deux agencements de surface, leurs avantages respectifs sont loin d'être unanimes. Des études animales et précliniques ont démontré l'efficacité de la fonctionnalisation en monocouches mixtes et, bien que des résultats in vitro prometteurs aient été rapportés pour les AuNP coiffées de lieurs PEG, les avantages potentiels de cette approche ne sont pas encore totalement compris.

Int J Nanomédecine. 30 mars 2023 : 18 : 1615-1630. est ce que je: 10.2147/IJN.S402418. eCollection 2023. Effets de la longueur de la chaîne de liaison PEG des formulations liposomales liées au folate sur la capacité de ciblage et l'activité antitumorale du médicament encapsulé Abstrait Introduction: Les liposomes conjugués à un ligand sont prometteurs pour le traitement des cancers surexprimant des récepteurs spécifiques. Cependant, les études précédentes ont montré des résultats contradictoires en raison des propriétés variables du ligand, de la présence d'un revêtement de polyéthylène glycol (PEG) sur le liposome, de la longueur du lieur et de la densité du ligand. Méthodes : Ici, nous avons préparé des liposomes PEGylés en utilisant des lieurs PEG de différentes longueurs conjugués au folate et avons évalué l'effet de la longueur du lieur PEG sur la distribution des nanoparticules et l'efficacité pharmacologique du médicament encapsulé à la fois in vitro et in vivo. Résultats: Lorsque le folate était conjugué à la surface du liposome, l'efficacité de captation cellulaire dans les cellules KB surexprimées par le récepteur du folate augmentait considérablement par rapport à celle du liposome normal. Cependant, la comparaison de l'effet de la longueur du PEG-linker in vitro n'a pas révélé de différence significative entre les formulations. En revanche, le niveau d'accumulation tumorale de particules in vivo augmentait significativement lorsque la longueur du PEG-linker augmentait. La taille tumorale était réduite de plus de 40 % dans le groupe traité par Dox/FL-10K par rapport aux groupes traités par Dox/FL-2K ou 5K. Discussion: Notre étude suggère qu’à mesure que la longueur du PEG-linker augmente, la capacité de ciblage tumoral peut être améliorée dans des conditions in vivo, ce qui peut conduire à une augmentation de l’activité antitumorale du médicament encapsulé. Mots-clés: Longueur du lieur PEG ; liposome PEGylé ; récepteur du folate ; liposome conjugué à un ligand.

Examen du Zhejiang Da Xue Xue Bao Yi Xue Ban. 25 avril 2022;51(2):185-191. est ce que je : 10.3724/zdxbyxb-2022-0047. Progrès de la recherche sur le système d'administration d'ARNm par nanoparticules lipidiques et son application dans la thérapie cellulaire CAR-T Abstrait La thérapie par cellules CAR-T à récepteur antigénique chimérique (CAR) a démontré une efficacité significative dans le traitement des hémopathies malignes. Cependant, elle doit être optimisée. Récemment, le système d'administration de nanoparticules lipidiques (LNP)-ARNm, utilisé comme vecteur de transfert de gènes non viral, a connu des progrès rapides dans la thérapie par cellules CAR-T. L'ARNm de la claudine-6 (CLDN6) est délivré aux cellules présentatrices d'antigène (CPA) par le système LNP, améliorant ainsi la fonction des cellules CAR-T CLDN6 pour l'élimination des cellules tumorales solides. Pour le traitement des lésions cardiaques aiguës, l'ARNm de la protéine d'activation des fibroblastes (FAP) peut être délivré aux cellules T par le système LNP pour la production in vivo de cellules CAR-T FAP, bloquant ainsi le processus de fibrose myocardique. Le système d'administration LNP-ARNm présente des avantages, notamment son absence d'intégration dans le génome de l'hôte, son faible coût, sa faible toxicité et sa modifiabilité. En revanche, il présente certains inconvénients, tels qu'une persistance cellulaire limitée due à l'expression transitoire des protéines et des limitations des techniques de préparation. Cet article passe en revue les avancées de la recherche sur le système d'administration in vivo de LNP-ARNm et son application dans la thérapie cellulaire CAR-T. Mots clés : Cellule T à récepteur d'antigène chimérique ; Vecteur de transfert de gènes ; Nanoparticule lipidique ; ARN messager ; Revue ; système de distribution. Pour plus d'informations sur les produits, veuillez nous contacter à : Tél. États-Unis : 1-844-782-5734 Tél. États-Unis : 1-844-QUAL-PEG CHN Tél. : 400-918-9898 Courriel : sales@sinopeg.com