Revue Mol Pharm. 2 déc. 2024 ; 21(12) : 5944-5959. doi : 10.1021/acs.molpharmaceut.4c00826. Publication en ligne le 11 nov. 2024. Développement de systèmes d'administration d'ARNm-LNP thermiquement stables : progrès actuels et perspectives d'avenir Abstrait Le succès des vaccins contre la COVID-19 à base d'ARNm-LNP ouvre une nouvelle ère pour les thérapies à base d'ARNm-LNP. Cette avancée devrait accélérer le développement de nouveaux médicaments à base d'ARNm-LNP, non seulement pour les vaccins préventifs, mais aussi à des fins thérapeutiques. Malgré ces perspectives prometteuses, des défis fondamentaux entravent le développement et l'application généralisée des formulations d'ARNm-LNP. L'un des principaux défis est leur instabilité thermique, qui nécessite de conserver ces produits à des températures ultra-basses pour une stabilité à long terme. Ces exigences spécifiques posent des défis importants pour le stockage, le transport et la distribution des formulations d'ARNm-LNP. Pour se préparer efficacement aux futures épidémies de maladies infectieuses et élargir l'application des thérapies à base d'ARNm-LNP à d'autres maladies, il est essentiel d'améliorer la thermostabilité des formulations d'ARNm-LNP. Dans cette revue, nous discutons des facteurs potentiels contribuant à l'instabilité thermique des formulations d'ARNm-LNP et examinons le rôle des composants clés tels que les lipides ionisables, le cholestérol, le pH, les tampons et les agents stabilisants comme les sucres dans le maintien de leur stabilité thermique, dans le but de fournir des informations qui peuvent guider le développement futur de formulations d'ARNm-LNP thermiquement stables. Mots clés : Formulations ; Stabilité fonctionnelle ; Nanoparticules lipidiques ; Stabilité physicochimique ; Stabilité thermique ; ARNm. Pour plus d'informations sur les produits, veuillez nous contacter à : Tél. États-Unis : 1-844-782-5734 Tél. États-Unis : 1-844-QUAL-PEG CHN Tél. : 400-918-9898 Courriel : sales@sinopeg.com

J Virol. 13 juin 2024;98(6):e0057824. est ce que je : 10.1128/jvi.00578-24. Publication en ligne le 20 mai 2024. Un vaccin contre le virus Lassa à base d'ARNm-LNP induit une immunité protectrice chez la souris Abstrait Le virus de Lassa (LASV) est responsable de la fièvre hémorragique potentiellement mortelle. L'absence de contre-mesures médicales homologuées contre le LASV souligne l'urgence de développer de nouveaux vaccins contre le LASV, un objectif rendu difficile par la nécessité d'une installation de niveau de biosécurité 4 pour manipuler le LASV vivant. Nous avons étudié ici l'efficacité de vaccins à base de nanoparticules lipidiques d'ARNm (ARNm-LNP) exprimant le précurseur glycoprotéique (LASgpc) ou la nucléoprotéine (LCMnp) du LASV, le virus prototypique de la chorioméningite lymphocytaire (LCMV), chez la souris. Deux doses de LASgpc- ou LCMnp-ARNm-LNP administrées par voie intraveineuse (iv) ont protégé les souris C57BL/6 d'une infection mortelle par un LCMV recombinant (r) exprimant un LASgpc modifié (rLCMV/LASgpc2m) inoculé par voie intracrânienne. L'immunisation intramusculaire (im) avec deux doses de LASgpc- ou LCMnp-ARNm-LNP a significativement réduit la charge virale chez les souris C57BL/6 inoculées par voie iv avec rLCMV/LASgpc2m. Des niveaux élevés de virémie et de létalité ont été observés chez les souris CBA inoculées par voie iv avec rLCMV/LASgpc2m, qui ont été abrogés par l'immunisation im avec deux doses de LASgpc-ARNm-LNP. L'efficacité protectrice de deux doses im de LCMnp-ARNm-LNP a été confirmée dans un modèle de maladie hémorragique mortelle chez des souris FVB inoculées par voie iv avec le rLCMV de type sauvage. Français Dans toutes les conditions testées, des niveaux négligeables et élevés d'anticorps spécifiques de LASgpc et de LCMnp ont été détectés chez les souris immunisées par l'ARNm-LNP, respectivement, mais des réponses robustes des lymphocytes T CD8+ spécifiques de LASgpc et de LCMnp ont été induites. En conséquence, le plasma des souris immunisées par l'ARNm-LNP de LASgpc n'a pas montré d'activité neutralisante. Nos résultats et les modèles murins de substitution de l'infection par le LASV, qui peuvent être étudiés à un niveau de bioconfinement réduit, fournissent une base essentielle pour le développement rapide de vaccins contre le LASV à base d'ARNm-LNP. IMPORTANCE Le virus de Lassa (LASV) est un mammarenavirus hautement pathogène responsable de plusieurs centaines de milliers d'infections chaque année dans les pays d'Afrique de l'Ouest, provoquant un nombre élevé de cas mortels de fièvre de Lassa (FL). Malgré son impact significatif sur la santé humaine, il n'existe pas de contre-mesures médicales cliniquement approuvées, sûres et efficaces contre la FL. L'exigence d'une installation de biosécurité de niveau 4 pour manipuler le virus LASV vivant a été l'un des principaux obstacles à la recherche et au développement de contre-mesures contre le virus LASV. Nous rapportons ici que deux doses de vaccins à ...

Biomedicines. 16 juin 2023 ;11(6):1735. doi : 10.3390/biomedicines11061735. L'ARNm-LNP ASL thérapeutique pour le traitement de l'acidurie argininosuccinique permet un bénéfice de survie dans un modèle murin Abstrait L'acidurie argininosuccinique (AAS) est un trouble métabolique causé par un déficit en argininosuccinate lyase (ASL), qui clive l'acide argininosuccinique en arginine et fumarate dans le cycle de l'urée. Ce déficit entraîne un dysfonctionnement hépatocytaire, une hyperammoniémie, une encéphalopathie et une alcalose respiratoire. Nous décrivons ici une nouvelle approche thérapeutique pour le traitement de l'AAS, basée sur l'ARN messager modifié par des nucléosides (ARNmod) formulé dans des nanoparticules lipidiques (LNP). Afin d'optimiser l'ARNm codant pour l'ASL, nous avons modifié sa coiffe, ses régions non traduites 5' et 3', sa séquence codante et sa queue poly(A). Nous avons testé plusieurs optimisations de l'ARNm formulé dans des cellules humaines et des souris C57BL/6 sauvages. La protéine ASL a montré une expression robuste in vitro et in vivo et un profil de sécurité favorable, avec une faible sécrétion de cytokines et de chimiokines, même après administration de doses croissantes d'ARNm-LNP d'ASL. Dans le modèle murin ASLNeo/Neo d'ASLD, l'administration intraveineuse du principal candidat thérapeutique, le LNP-ASL CDS2, a considérablement amélioré la survie des souris. Administrées deux fois par semaine, des doses plus faibles ont partiellement protégé les souris, tandis que 3 mg/kg de LNP-ASL CDS2 les ont totalement protégées. Ces résultats démontrent le potentiel considérable de l'ARNm codant pour l'ASL modifié, formulé à partir de LNP, comme alternative efficace aux approches basées sur les AAV pour le traitement de l'ASA. Mots-clés : déficit en argininosuccinate lyase (ASLD) ; acidurie argininosuccinique (ASA) ; nanoparticules lipidiques-ARNm (LNP-ARNm) ; optimisation de l'ARNm ; ARNm thérapeutique ; maladie rare. Pour plus d'informations sur les produits, veuillez nous contacter à : Tél. États-Unis : 1-844-782-5734 Tél. États-Unis : 1-844-QUAL-PEG CHN Tél. : 400-918-9898 Courriel : sales@sinopeg.com

Revue Eur J Pharm Biopharm. 2024 avr. : 197:114222. doi : 10.1016/j.ejpb.2024.114222. Publication en ligne le 20 février 2024. Cinétique de l'administration d'ARN-LNP et de l'expression des protéines Abstrait Les nanoparticules lipidiques (LNP) utilisant des lipides ionisables constituent la technologie la plus avancée pour l'administration d'ARN, et plus particulièrement d'ARNm, aux cellules. Les LNP sont des particules cœur-coquille bien définies, dotées d'une encapsulation efficace des acides nucléiques, d'une faible immunogénicité et d'une efficacité accrue. Si la structure et l'activité des LNP sont bien connues, le moment de l'absorption des LNP, du transfert cytosolique et de l'expression des protéines est moins étudié. Cependant, la cinétique des LNP est un facteur clé de l'efficacité de l'administration. Par conséquent, une compréhension quantitative de la voie multi-cascade des LNP est intéressante pour élucider le mécanisme d'administration. Nous passons ici en revue les expériences et la modélisation théorique du moment de l'absorption des LNP, de la libération de l'ARNm et de l'expression des protéines. Nous décrivons l'administration des LNP comme une séquence de processus de transfert stochastique et examinons un modèle mathématique de la traduction ultérieure des protéines à partir de l'ARNm. Nous compilons les probabilités et les nombres obtenus par microscopie à résolution temporelle. Plus précisément, l'imagerie de cellules vivantes sur matrices de cellules uniques (LISCA) permet l'acquisition à haut débit de milliers de séquences d'expression individuelles du rapporteur GFP. Les traces fournissent la distribution des durées de vie, des taux d'expression et du début d'expression des ARNm. L'analyse de corrélation révèle une dépendance inverse entre l'efficacité de l'expression génique et le début de la transfection. Enfin, nous expliquons pourquoi le moment de la libération de l'ARNm est crucial dans le contexte de la co-administration de plusieurs espèces d'acides nucléiques, comme dans le cas de la co-expression d'ARNm ou de l'édition génique CRISPR/Cas. Pour plus d'informations sur les produits, veuillez nous contacter à : Tél. États-Unis : 1-844-782-5734 Tél. États-Unis : 1-844-QUAL-PEG CHN Tél. : 400-918-9898 Courriel : sales@sinopeg.com

Revue Biomedicines. 10 mai 2021 ; 9(5): 530. doi : 10.3390/biomedicines9050530. Application non immunothérapeutique de l'ARNm LNP : optimiser l'efficacité et la sécurité Abstrait Les vaccins à base d'ARN messager (ARNm-LNP) formulés à partir de nanoparticules lipidiques (LNP) ont été mis en lumière comme les premiers vaccins contre le virus SARS-CoV-2 à être utilisés à l'échelle mondiale. Les avantages connus depuis longtemps des technologies à base d'ARNm, notamment une ingénierie relativement simple et rapide de l'ARNm codant pour les antigènes et les protéines d'intérêt, l'absence d'intégration génomique et un processus de fabrication rapide et efficace par rapport à d'autres produits biologiques, ont été vérifiés, établissant ainsi les bases d'un large éventail d'applications. L'immunogénicité intrinsèque de l'ARNm transcrit in vitro (IVT) formulé à partir de LNP est bénéfique pour les vaccins à ARNm-LNP. Cependant, éviter l'activation immunitaire est essentiel pour les applications thérapeutiques de l'ARNm-LNP pour le remplacement des protéines, où l'expression ciblée de l'ARNm et l'administration répétée de doses élevées tout au long de la vie sont nécessaires. Cette revue résume nos connaissances actuelles sur l'activation immunitaire induite par l'ARNm, les sous-produits de l'IVT et les LNP. Cet article présente un aperçu complet de l'état actuel des études précliniques et cliniques dans lesquelles l'ARNm-LNP est utilisé pour le remplacement protéique et le traitement de maladies rares, en mettant l'accent sur la sécurité. De plus, la revue présente les innovations et les stratégies visant à faire progresser la pharmacologie et la sécurité de l'ARNm-LNP pour des applications hors immunothérapie. Mots clés : LNP-ARNm ; thérapie de remplacement des protéines par ARN ; cytokines ; efficacité ; transcription in vitro (IVT) ; immunité innée ; nanoparticule lipidique ; applications non immunothérapeutiques ; maladie rare ; sécurité. Pour plus d'informations sur les produits, veuillez nous contacter à : Tél. États-Unis : 1-844-782-5734 Tél. États-Unis : 1-844-QUAL-PEG CHN Tél. : 400-918-9898 Courriel : sales@sinopeg.com

Revue Adv Drug Deliv Rev. 2022 Sep:188:114416. doi: 10.1016/j.addr.2022.114416. Epub 2022 Jul 3. Le rôle des composants lipidiques dans les nanoparticules lipidiques pour les vaccins et la thérapie génique Abstrait Les nanoparticules lipidiques (LNP) jouent un rôle important dans les vaccins à ARNm contre la COVID-19. De plus, de nombreuses études précliniques et cliniques, notamment celle du produit siRNA-LNP, Onpattro®, soulignent que les LNP exploitent pleinement le potentiel des thérapies et vaccins à base d'acides nucléiques. Pour comprendre la clé du succès des LNP, il est essentiel de comprendre le rôle des éléments constitutifs qui les constituent. Dans cette revue, nous analysons l'apport de chaque composant lipidique à la plateforme d'administration des LNP en termes de taille, de structure, de stabilité, de pKa apparent, d'efficacité d'encapsulation des acides nucléiques, d'absorption cellulaire et d'échappement endosomal. Pour explorer ce sujet, nous présentons des résultats issus du domaine des liposomes ainsi que des articles de référence et récents sur les LNP. Nous abordons également les défis et les stratégies liés aux études in vitro/in vivo des LNP, basées sur les mesures de fluorescence, l'immunogénicité/réactogénicité et l'administration des LNP au-delà du foie. La manière dont ces défis fondamentaux sont relevés, y compris les composants lipidiques ajoutés et combinés, déterminera probablement la portée des thérapies géniques et des vaccins à base de LNP pour le traitement de diverses maladies. Mots clés : Administration de médicaments ; Lipide auxiliaire ; Lipide ionisable ; LNP ; Nanoparticules lipidiques ; Acide nucléique ; Lipide PEGylé ; Propriétés physicochimiques ; Ciblage ; pK(a). Pour plus d'informations sur les produits, veuillez nous contacter à : Tél. États-Unis : 1-844-782-5734 Tél. États-Unis : 1-844-QUAL-PEG CHN Tél. : 400-918-9898 Courriel : sales@sinopeg.com

Revue Acc Chem Res. 4 janvier 2022 ; 55(1):2-12. doi : 10.1021/acs.accounts.1c00544. Publication en ligne le 1er décembre 2021. Chimie des nanoparticules lipidiques pour l'administration d'ARN Abstrait Les nanoparticules lipidiques (LNP) sont un type de vésicules lipidiques possédant un noyau lipidique homogène. Ces vésicules sont largement utilisées pour l'administration de médicaments et d'acides nucléiques à petites molécules et ont récemment suscité beaucoup d'intérêt en raison de leur succès remarquable comme plateforme d'administration pour les vaccins à ARNm contre la COVID-19. Néanmoins, l'utilité de l'expression transitoire des protéines induite par l'ARNm va bien au-delà des vaccins contre les maladies infectieuses : elles sont également prometteuses pour les vaccins contre le cancer, les thérapies de remplacement des protéines et les composants d'édition génique pour les maladies génétiques rares. Cependant, l'ARNm nu est intrinsèquement instable et sujet à une dégradation rapide par les nucléases et à l'auto-hydrolyse. L'encapsulation de l'ARNm dans les LNP le protège des ribonucléases extracellulaires et facilite l'administration intracellulaire de l'ARNm. Dans cet article, nous abordons les principales caractéristiques des LNP pour l'administration d'ARN. Nous nous concentrons sur les LNP conçus pour l'administration d'ARNm ; Cependant, nous incluons également des exemples d'administration de siRNA-LNP lorsque cela est approprié afin de mettre en évidence les points communs et les différences dues à la structure de l'acide nucléique. Tout d'abord, nous présentons le concept des LNP, les avantages et les inconvénients de l'utilisation des acides nucléiques comme agents thérapeutiques, et le raisonnement général derrière la composition moléculaire des LNP. Nous soulignons également brièvement les succès cliniques les plus récents des thérapies à base d'acides nucléiques à base de LNP. Ensuite, nous décrivons la théorie et les méthodes d'auto-assemblage des LNP. L'idée commune derrière toutes les méthodes de préparation est d'induire des interactions électrostatiques entre l'acide nucléique et les lipides chargés et de favoriser la croissance des nanoparticules via des interactions hydrophobes. Troisièmement, nous décomposons la composition des LNP en accordant une attention particulière aux propriétés fondamentales et aux objectifs de chaque composant. Cela inclut les critères de conception moléculaire identifiés, l'approvisionnement commercial, l'impact sur le trafic intracellulaire et la contribution aux propriétés des LNP. L'un des composants clés des LNP est les lipides ionisables, qui initient la liaison électrostatique avec les membranes endosomales et facilitent la libération cytosolique ; Cependant, le rôle des autres composants lipidiques ne doit pas être négligé, car ils sont associés à la stabilité, à la clairance et à la distribution des LNP. Quatrièmement, nous examinons les attributs des constructions LNP dans leur ensem...

Revue de recherche (Wash DC). 18 juin 2024:7:0370. doi: 10.34133/research.0370. eCollection 2024. Débloquer l'applicabilité thérapeutique de l'ARNm LNP : chimie, formulation et stratégies cliniques Abstrait L'ARN messager (ARNm) s'est imposé comme une modalité thérapeutique innovante, offrant des perspectives prometteuses pour la prévention et le traitement de diverses maladies. Le formidable succès des vaccins à ARNm dans la lutte contre la maladie à coronavirus 2019 (COVID-19) témoigne du potentiel médical et thérapeutique illimité de la technologie de l'ARNm. Les progrès récents dans le domaine des nanoparticules lipidiques (LNP) ont permis de surmonter les défis liés à la stabilité, à l'immunogénicité et au ciblage précis de l'ARNm. Cette revue résume les thérapies de pointe à base de LNP-ARNm, notamment leur structure, leurs compositions, leurs directives de conception et leurs principes de criblage. De plus, nous mettons en évidence les tendances précliniques et cliniques actuelles des thérapies à base de LNP-ARNm dans un large éventail de traitements, notamment en ophtalmologie, en immunothérapie du cancer, en édition génétique et en médecine des maladies rares. Une attention particulière est accordée à la traduction et à l'évolution des vaccins à base de LNP-ARNm vers un spectre thérapeutique plus large. Nous explorons les préoccupations liées à l'efficacité insuffisante du ciblage extrahépatique, aux doses élevées, aux problèmes de sécurité et aux défis des procédures de production à grande échelle. Cette discussion pourrait offrir des perspectives de développement clinique à court et à long terme pour les thérapies à base d'ARNm-LNP. Pour plus d'informations sur les produits, veuillez nous contacter à : Tél. États-Unis : 1-844-782-5734 Tél. États-Unis : 1-844-QUAL-PEG CHN Tél. : 400-918-9898 Courriel : sales@sinopeg.com