PEGylation du cytochrome c au niveau des résidus de lysine médiée par une transglutaminase microbienne
Jian Qin Zhou 1, Ting He 1, Jian Wen Wang 2
Résumé
Objectifs : Établir une méthode de PEGylation médiée par la transglutaminase microbienne (mTG) de protéines au niveau des résidus lysine (Lys).
Résultats : Le carboxybenzyl-glutaminyl-glycinyl-méthoxypolyéthylèneglycol (CBZ-QG-mPEG) a été préparé en introduisant la carboxybenzyl-glutaminyl-glycine (CBZ-QG) dans l'amine mPEG. L'analyse par spectroscopie infrarouge à transformée de Fourier et SDS-PAGE a montré que CBZ-QG-mPEG a été synthétisé avec succès et peut être reconnu par mTG en tant que donneur d'acyle pour modifier la protéine thérapeutique, le cytochrome c (cyt c). Enfin, dans des conditions optimisées (cyt c 0,5 mg/ml, CBZ-QG-mPEG 11,25 mg/ml, mTG 0,5 mg/ml, 37 °C, 2 h), le rendement de PEGylation a atteint 76,5 %.
Conclusions : Il s'agit de la première étude concernant la PEGylation de protéines au niveau des résidus Lys catalysée par mTG. La nouvelle méthode pourrait être utilisée pour immobiliser des protéines actives et modifier des protéines thérapeutiques.
Mots clés : Résidu de lysine ; Transglutaminase microbienne ; PEGylation ; Protéine thérapeutique ; Transglutaminase.
Abréviation : mPEG-NH2
Nom : Méthoxypoly(éthylène glycol) amine
Abréviation : mPEG-SPA
Nom : Méthoxypoly(éthylène glycol) succinimidyl propionate
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