Conception de nanoparticules lipidiques pour améliorer l'administration intracellulaire d'ARNsi du facteur de croissance transformant bêta (siTGF-β1) par inhalation afin d'améliorer la fibrose pulmonaire après une stimulation par la bléomycine.
Abstrait
Contexte/Objectifs : Le facteur de croissance transformant bêta (TGFβ1) joue un rôle central dans la fibrose pulmonaire (FP). La progression de la fibrose pulmonaire peut être ralentie par l’inhibition du TGFβ1 via des siRNA. Cependant, les limitations des siRNA non modifiés expliquent l’absence d’effet thérapeutique. Cette étude visait à concevoir des nanoparticules lipidiques (NPL) capables de délivrer du siTGFβ1 aux poumons à des fins thérapeutiques. Méthodes : Des tests de cytotoxicité et de transfection in vitro ont été utilisés pour sélectionner des lipides ionisables (LI). Un plan d’expériences (DOE) a permis d’obtenir de nouvelles NPL présentant une résistance accrue aux forces de cisaillement lors de l’atomisation. L’impact des NPL encapsulant le siTGFβ1 (NPL-siTGFβ1) sur la FP a ensuite été étudié. Résultats : Lorsque le DLin-DMA-MC3 (MC3) a été utilisé comme liquide ionique, le rapport de la phase lipidique était de MC3:DSPC:DMG-PEG2000:cholestérol = 50:10:3:37, et le rapport N/P = 3,25. Les siTGFβ1-LNPs ont pu être administrés de manière stable aux poumons par atomisation de la solution. Des expériences in vitro ont confirmé la haute sécurité et l’encapsulation efficace des siTGFβ1-LNPs, ainsi que leur capacité à favoriser l’internalisation cellulaire et l’échappement endosomal. De plus, les siTGFβ1-LNPs ont réduit significativement l’infiltration inflammatoire et atténué le dépôt de matrice extracellulaire (MEC), protégeant ainsi le tissu pulmonaire de la toxicité de la bléomycine (BLM) sans induire de toxicité systémique. Conclusions : Les siTGFβ1-LNP peuvent être efficacement délivrés aux poumons, entraînant le silençage de l’ARNm du TGF-β1 et l’inhibition de la voie de transition épithélio-mésenchymateuse, retardant ainsi le processus de fibrose pulmonaire, ce qui constitue une nouvelle méthode de traitement et d’intervention contre la fibrose pulmonaire.
Mots-clés : conception d’expériences (DOE) ; nanoparticules lipidiques (LNP) ; fibrose pulmonaire (PF) ; administration d’ARNsi ; facteur de croissance transformant β1 (TGF-β1).
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